Иммуногистохимическое исследование (ИГХ)

Иммуногистохимическое исследование — это лабораторный метод, при котором на срез ткани наносят антитела к определённым белкам, а затем специальной реакцией окрашивают места, где антитело связалось со своей мишенью. Так под микроскопом становится видно, какие белки вырабатывают клетки и в каких участках ткани они находятся.

Сокращённо метод называют ИГХ, или иммуногистохимией. Его выполняют на тех же парафиновых блоках, что и обычное гистологическое исследование, и чаще всего используют в онкологии: чтобы уточнить происхождение опухоли, её подтип и найти мишени для лечения. Результаты оценивает врач-патоморфолог.

⚙️ Принцип метода

В основе ИГХ лежит способность антител очень избирательно связываться с определённым участком белка — антигеном. Лабораторные антитела к нужному белку наносят на срез ткани. Если белок есть, антитело на нём закрепляется. Затем добавляют систему выявления с ферментом, который превращает бесцветное вещество в окрашенный осадок, чаще всего коричневый. Ядра клеток докрашивают в синий цвет для ориентации.

Перед окраской срезы специальным образом обрабатывают, чтобы «раскрыть» белки, замаскированные формалиновой фиксацией. Каждую серию окрашивания сопровождают контрольными образцами с заведомо известным результатом — это позволяет убедиться, что реакция сработала правильно. Сегодня окраску всё чаще выполняют автоматические аппараты.

🎯 Какие задачи решает ИГХ

• Определение происхождения опухоли: отличить рак от лимфомы, меланомы или саркомы и установить, из какого органа пришёл метастаз неясного происхождения.
• Подтипирование опухолей: например, разделение лимфом на многочисленные варианты, которые лечат по-разному.
• Определение прогностических маркеров, которые говорят об агрессивности опухоли, например индекса пролиферации Ki-67.
• Определение предсказательных маркеров, от которых зависит выбор лечения: рецепторов гормонов, HER2, PD-L1.
• Выявление возбудителей инфекций и оценка неопухолевых болезней, например отторжения пересаженных органов.

Примеры часто определяемых маркеров

При раке молочной железы ИГХ на рецепторы гормонов, HER2 и Ki-67 выполняют практически всем пациенткам: по сочетанию этих маркеров выделяют подтипы опухоли и планируют лечение. При колоректальном раке обязательно оценивают белки системы репарации ДНК. Определение PD-L1 и белков репарации помогает решить вопрос об иммунотерапии.

📊 Как записывают результат

В заключении указывают, какие маркеры исследованы и каков результат: положительный или отрицательный, доля окрашенных клеток в процентах, интенсивность окраски, иногда суммарный балл. Для HER2 используют шкалу от 0 до 3+. Способ подсчёта и пороговые значения для каждого маркера устанавливают международные рекомендации, поэтому трактовка зависит от конкретного маркера и вида опухоли.

⚠️ Ограничения и сроки

• ИГХ показывает наличие белка, но не всегда отражает изменения в генах; при сомнительных результатах применяют молекулярные методы, например гибридизацию in situ.
• Долгое время до фиксации и неправильная фиксация ткани могут дать ложноотрицательный результат.
• Небольшой образец может не отражать всю опухоль, особенно если она неоднородна.
• Методики и антитела в разных лабораториях отличаются, а оценка части маркеров отчасти субъективна.
• Исследование обычно добавляет несколько дней к сроку готовности гистологического заключения.

Набор маркеров выбирает патоморфолог исходя из задачи. Больше маркеров не значит лучше: лишние окраски удлиняют срок и расходуют ткань, которая может понадобиться для молекулярных тестов.