Тесты высвобождения гамма-интерферона (IGRA)

ТЕСТЫ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ ГАММА-ИНТЕРФЕРОНА (IGRA; INTERFERON-GAMMA RELEASE ASSAYS)

1. Определение

Тесты высвобождения гамма-интерферона (IGRA, interferon-gamma release assays) представляют собой лабораторные иммунологические анализы крови, выявляющие инфицирование микобактериями туберкулёза по ответу Т-лимфоцитов на специфические белки возбудителя. В пробирке лимфоциты пациента контактируют с антигенами ESAT-6 и CFP-10, и если иммунная система ранее встречалась с Mycobacterium tuberculosis, сенсибилизированные клетки выделяют гамма-интерферон, количество которого измеряется. IGRA применяются для диагностики туберкулёзной инфекции, в том числе латентной, и не зависят от предшествующей вакцинации БЦЖ. Тесты не позволяют отличить латентную инфекцию от активного туберкулёза.

Наиболее известные коммерческие тесты — QuantiFERON-TB Gold Plus (метод иммуноферментного анализа) и T-SPOT.TB (метод ELISPOT, подсчёт клеток, продуцирующих интерферон).

2. Принцип метода

Антигены ESAT-6 и CFP-10 кодируются областью генома RD1, которая присутствует у Mycobacterium tuberculosis, но отсутствует у вакцинного штамма БЦЖ и у большинства нетуберкулёзных микобактерий (исключения — M. kansasii, M. szulgai, M. marinum). Поэтому, в отличие от туберкулиновой пробы Манту, результат IGRA не становится ложноположительным после прививки БЦЖ.

В России с теми же антигенами (CFP-10 и ESAT-6) применяется внутрикожная проба с аллергеном туберкулёзным рекомбинантным (Диаскинтест), которая также не реагирует на БЦЖ, но является кожным тестом, а не анализом крови, и к IGRA не относится.

3. Показания

• Выявление туберкулёзной инфекции у лиц из групп риска: контактных с больным туберкулёзом, людей, живущих с ВИЧ, медицинских работников.

• Обследование перед назначением иммуносупрессивной терапии, в том числе генно-инженерных биологических препаратов (ингибиторов фактора некроза опухоли и других), глюкокортикостероидов в высоких дозах, перед трансплантацией органов.

• Обследование лиц, привитых БЦЖ, у которых положительная проба Манту не может быть однозначно интерпретирована.

• Вспомогательная диагностика при подозрении на активный туберкулёз (в сочетании с лучевыми и микробиологическими методами).

• Беременные из групп риска туберкулёза.

Всемирная организация здравоохранения в консолидированных рекомендациях по туберкулёзу допускает использование как туберкулиновой пробы, так и IGRA для выявления туберкулёзной инфекции. Российские клинические рекомендации по туберкулёзу у взрослых предусматривают применение пробы с аллергеном туберкулёзным рекомбинантным и тестов высвобождения гамма-интерферона.

4. Подготовка и проведение

Специальной подготовки не требуется. Кровь берут из вены в специальные пробирки (для QuantiFERON) или в пробирки с антикоагулянтом (для T-SPOT.TB); образец необходимо доставить в лабораторию и обработать в установленные производителем сроки, поскольку лимфоциты должны оставаться жизнеспособными. В отличие от кожных проб, анализ не требует повторного визита для оценки результата, на него не влияет субъективность «чтения» реакции и нет эффекта бустинга при повторных исследованиях.

Исследование безопасно во время беременности. По данным Центров по контролю и профилактике заболеваний США (CDC), анализ IGRA у беременных безопасен, хотя изучен в этой группе меньше, чем туберкулиновая проба.

5. Интерпретация результатов

• Положительный результат: указывает на инфицирование Mycobacterium tuberculosis. Для разграничения латентной инфекции и активного туберкулёза необходимы оценка симптомов, рентгенография или компьютерная томография органов грудной клетки и при показаниях микробиологическое и молекулярно-генетическое исследование мокроты.

• Отрицательный результат: инфицирование маловероятно, однако активный туберкулёз полностью не исключается, особенно у пациентов с иммуносупрессией и у детей раннего возраста.

• Неопределённый результат: часто связан с недостаточным ответом в контрольной пробирке с митогеном (лимфопения, иммуносупрессия, тяжёлое состояние) или с нарушением правил обработки образца; требует повторного исследования или использования другого метода.

При положительном тесте и исключении активного туберкулёза диагностируется латентная туберкулёзная инфекция; решение о превентивном лечении принимает фтизиатр с учётом риска перехода инфекции в активную форму. У беременных лечение латентной инфекции при отсутствии высокого риска нередко откладывают до послеродового периода.

6. Ограничения и осложнения

• Тесты не различают латентную инфекцию и активный туберкулёз и не позволяют судить о давности инфицирования.

• Чувствительность снижается при иммунодефиците, в том числе при ВИЧ-инфекции с низким уровнем CD4-лимфоцитов, у маленьких детей и при тяжёлых формах туберкулёза.

• Возможны ложноположительные результаты при инфекции M. kansasii, M. szulgai, M. marinum.

• Результаты вблизи порогового значения могут колебаться при повторных исследованиях.

• Анализ дороже кожных проб и требует лабораторного оборудования и соблюдения условий доставки образцов.

• Осложнений, кроме обычных для венепункции, метод не имеет.

---

Ключевое клиническое положение: Тесты высвобождения гамма-интерферона (IGRA) — анализы крови, выявляющие туберкулёзную инфекцию по выделению гамма-интерферона Т-лимфоцитами в ответ на специфические антигены ESAT-6 и CFP-10. Поскольку эти антигены отсутствуют у вакцинного штамма БЦЖ, результат не зависит от прививки, в отличие от пробы Манту. Наиболее распространены QuantiFERON-TB Gold Plus и T-SPOT.TB. Тесты применяются для выявления инфекции у контактных, людей с ВИЧ, перед иммуносупрессивной терапией и в других группах риска, но не отличают латентную инфекцию от активного туберкулёза: при положительном результате необходимо обследование органов грудной клетки и при показаниях исследование мокроты. Чувствительность снижается при иммунодефиците, возможны неопределённые результаты. В России наряду с IGRA применяется кожная проба с аллергеном туберкулёзным рекомбинантным (Диаскинтест) с теми же антигенами. Анализ безопасен при беременности.